Hemoglobin analysis after overload training in athletes / Análise de hemoglobina após treinamento de sobrecarga em atletas / Análisis de la hemoglobina tras el entrenamiento de sobrecarga en atletas

ABSTRACT Introduction: The cardiovascular system provides athletes with the proper conditions for blood circulation, ensuring the stability and normal metabolism of the body's internal environment during exercise. Objective: Investigate the effect of overload training on the hemoglobin of male taekwondo athletes. Methods: Twenty-one male taekwondo athletes (level 2 or higher) were selected and trained for four weeks, five days per week, with an initial load intensity of 60% of the maximum heart rate and a weekly intensity increase of 10%. Before training and on every weekend during training, hemoglobin (Hb), mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC), reticulocyte count (Ret) were checked, RBC volume distribution width (RDW), hemoglobin content distribution width (HDW), mean reticulocyte volume (MCVr), mean reticulocyte hemoglobin concentration (CHCMr), serum iron (Fe) and ferritin (Fer). Results: After four weeks of increasing load training, athletes showed a progressive and significant decrease in Hb (P<0.01), manifested as exercise-induced hypohemoglobin, and MCV, MCH, MCHC, CHCMr, HDW, and serum ferritin were significantly or extremely decreased(P<0.) 05, P<0.01); RDW increased significantly (P<0.05); Changes in Ret and serum iron showed no statistical significance (P>0.05). Correlation analysis found that hemoglobin concentration had the highest correlation with MCHC and CHCMr. Conclusion: Four-week incremental load training can induce exercise-induced hypohemoglobin in male taekwondo athletes, its changes being most correlated with MCHC and CHCMr, but without significant correlation with serum Fe, RDW, HDW, and MCV. Level of Evidence: Therapeutic Studies -Investigation of Outcomes.

RESUMO Introdução: O sistema cardiovascular fornece aos atletas as condições propícias para a circulação sanguínea, garantindo a estabilidade e o metabolismo normal do ambiente interno corporal durante o exercício. Objetivo: Investigar o efeito do treinamento em sobrecarga sobre a hemoglobina dos atletas masculinos de Taekwondo. Métodos: Vinte e um atletas masculinos de taekwondo (nível 2 ou superior) foram selecionados e treinados durante 4 semanas, 5 dias por semana, com uma intensidade de carga inicial de 60% da frequência cardíaca máxima e um aumento de intensidade semanal de 10%. Antes do treinamento e em todos os fins de semana durante o treinamento, foi verificada a hemoglobina (Hb), volume corpuscular médio (MCV), hemoglobina corpuscular média (MCH), concentração corpuscular média de hemoglobina (MCHC), contagem de reticulócitos (Ret), largura de distribuição do volume de hemácias (RDW), largura de distribuição do conteúdo de hemoglobina (HDW), volume médio de reticulócitos (MCVr), concentração média de hemoglobina reticulócitos (CHCMr), ferro sérico (Fe) e ferritina (Fer). Resultados: Após 4 semanas em treinamento de carga crescente, os atletas mostraram uma diminuição progressiva e significativa em Hb(P<0,01), manifestada como hipohemoglobina induzida por exercício, e MCV, MCH, MCHC, CHCMr, HDW, e ferritina sérica foram significativamente ou extremamente diminuídos(P<0). 05, P<0,01); RDW aumentou significativamente (P<0,05); Alterações de Ret e ferro sérico não apresentaram significância estatística (P>0,05). A análise de correlação constatou que a concentração de hemoglobina teve a maior correlação com MCHC e CHCMr. Conclusão: O treinamento de carga incremental de quatro semanas pode induzir hipohemoglobina induzida por exercício em atletas taekwondo masculinos, sendo suas alterações mais correlacionadas com MCHC e CHCMr, mas sem correlação significativa com Fe sérico, RDW, HDW e MCV. Nível de evidência: Estudos Terapêuticos -Investigação dos Resultados.

RESUMEN Introducción: El sistema cardiovascular proporciona a los deportistas las condiciones propicias para la circulación sanguínea, garantizando la estabilidad y el metabolismo normal del medio corporal interno durante el ejercicio. Objetivo: Investigar el efecto del entrenamiento de sobrecarga en la hemoglobina de los atletas masculinos de taekwondo. Métodos: Se seleccionaron 21 atletas masculinos de taekwondo (de nivel 2 o superior) y se entrenaron durante 4 semanas, 5 días a la semana, con una intensidad de carga inicial del 60% de la frecuencia cardíaca máxima y un aumento semanal de la intensidad del 10%. Antes del entrenamiento y cada fin de semana durante el mismo, se comprobó la hemoglobina (Hb), el volumen corpuscular medio (MCV), la hemoglobina corpuscular media (HCM), la concentración de hemoglobina corpuscular media (MCH) y el recuento de reticulocitos (Ret), Anchura de distribución del volumen de glóbulos rojos (RDW), anchura de distribución del contenido de hemoglobina (HDW), volumen reticulocitario medio (MCVr), concentración media de hemoglobina reticulocitaria (CHCMr), hierro sérico (Fe) y ferritina (Fer). Resultados: Después de 4 semanas de entrenamiento con carga creciente, los atletas mostraron una disminución progresiva y significativa de la Hb (P<0,01), que se manifestó como hipohemoglobina inducida por el ejercicio, y el MCV, el MCH, el MCHC, el CHCMr, el HDW y la ferritina sérica disminuyeron de forma significativa o extrema (P<0,01). 05, P<0,01); el ADE aumentó significativamente (P<0,05); los cambios en el Ret y el hierro sérico no mostraron significación estadística (P>0,05). El análisis de correlación encontró que la concentración de hemoglobina tenía la mayor correlación con MCHC y CHCMr. Conclusión: El entrenamiento de carga incremental de cuatro semanas puede inducir hipohemoglobina inducida por el ejercicio en atletas masculinos de taekwondo, siendo sus cambios los más correlacionados con MCHC y CHCMr, pero sin correlación significativa con el Fe sérico, RDW, HDW y MCV. Nivel de evidencia: Estudios terapéuticos - Investigación de resultados.

Correlação entre as contagens de reticulócitos manual e automática em amostras de felinos anêmicos / Correlation between manual and automatized values of reticulocyte count in anemic feline samples

O objetivo do presente estudo foi correlacionar os valores de reticulócitos pontilhados e agregados obtidos por metodologia manual com a metodologia automática de contagem de reticulócitos totais em amostras de sangue de gatos anêmicos, analisados em um contador hematológico com citometria de fluxo. Para isso, 40 amostras de sangue de pacientes felinos anêmicos, independentemente de idade e sexo, foram utilizadas para a determinação das contagens absolutas de reticulócitos totais pela metodologia automatizada por citometria de fluxo fluorescente e pela técnica manual com corante supravital, em duplicata. Na contagem manual, houve a discriminação entre reticulócitos pontilhados e agregados. Para a correlação entre os métodos, foi realizada a análise de regressão de Passing-Bablok. A média do hematócrito dos gatos foi de 15,25%, tendo a maioria dos gatos (32,5%) apresentado anemia moderada (hematócrito = 17,81%). Como resultados, a análise de regressão demonstrou que a correlação entre a contagem absoluta total automática foi superior à contagem manual de reticulócitos agregados (rho= 0,71; P<0,001) do que a contagem absoluta de reticulócitos pontilhados (rho= 0,68; P<0,001). Os resultados apresentados sugerem que a contagem de reticulócitos total absoluta realizada pelo analisador hematológico ProCyte Dx em gatos anêmicos se refere à contagem absoluta de reticulócitos. Dessa maneira, recomenda-se que os valores possam ser utilizados para a avaliação imediata da condição hematológica de gatos anêmicos.(AU)

The aim of this study was to correlate the punctate and aggregated reticulocytes values obtained by manual methodology and the automatic reticulocyte count in 40 blood samples from anemic cats. Total reticulocyte absolute counts were determined by automated fluorescence flow cytometry and manual methods in 40 blood samples obtained from anemic cats. The manual count was obtained by supravital stain in duplicate to each sample and the reticulocyte morphology were discriminated between punctate and aggregates reticulocytes. Passing-Bablok regression analysis was utilized to compare the methods. Most samples were from anemic cat (15,25%) and the hematocrit mean was 17,81%. Regression analysis showed that the correlation between the absolute total automatic counts is higher with aggregated reticulocytes (rho= 0,71; P< 0,001) than with absolute punctate reticulocytes counts (rho= 0, 68, P< 0.001). Results suggest that the ProCyte Dx reticulocytes count in anemic cats is correlated with aggregate reticulocyte count. Thus, the greater amount of RNA and organelles in aggregate reticulocytes generates a cellular complexity and, therefore, greater impregnation of the dye in an automatic count. Thus, the values obtained by the hematologic instrument can be used for the immediate evaluation of the hematological condition in anemic cats.(AU)

Contagem de Reticulócitos na Prática Clínica: um Exame Pouco Utilizado / Reticulocytes Counting in Clinical Practice: a Little Examination Used

Objetivo: Estimar o percentual de contagem de reticulócitos em relação aos hemogramas realizados nos laboratórios de análises clínicas de Divinópolis/MG. Métodos: Trata-se de um estudo descritivo realizado nos laboratórios de análises clínicas do município de Divinópolis/MG inscritos no Cadastro Nacional de Estabelecimento de Saúde (CNES). Foi realizada uma entrevista através de questionário a fim de obter as informações dos números de hemogramas e contagens de reticulócitos realizados durante os últimos 12 meses, do atendimento (ambulatorial ou hospitalar), da instituição (pública ou privada), do porte (pequeno, médio ou grande) e de quais os métodos eram utilizados para realização dos exames. Resultados: Dos 15 laboratórios inscritos no CNES, 11 foram entrevistados (73%). Foram realizados 276.666 hemogramas e 4.248 contagens de reticulócitos nos últimos 12 meses em todos os laboratórios, o que significa o percentual de 1,5% de contagem de reticulócitos em relação aos hemogramas realizados. A maioria dos laboratórios é privado (81%), de médio porte (54%) e realizam atendimento ambulatorial (54%). Para realizar o hemograma, a maioria (81%) utiliza a técnica citometria de fluxo e para a contagem de reticulócitos todos realizam a técnica manual com o reagente azul de cresil brilhante. Conclusão: O percentual de contagem de reticulócitos em relação aos hemogramas realizados em laboratórios do município de Divinópolis/MG é baixo, mesmo sendo o primeiro exame complementar para o diagnóstico diferencial da anemia. Essa baixa solicitação pode estar relacionada com a desvalorização do exame no meio clínico ou pela falta de acurácia e pobre reprodutibilidade dos resultados encontrados. (AU)

Objective: To estimate the percentage of reticulocyte counts in relation to blood count performed in the clinical analysis laboratories in Divinópolis / MG. Methods: This is a descriptive study carried out in the clinical analysis laboratories of Divinópolis/MG registered in the National Register of Health Establishment (CNES). A questionnaire interview was conducted in order to obtain information on the number of blood counts and reticulocyte counts performed during the last twelve months. The questionnaire also aimed to identify whether the institution was public or private, whether it was outpatient or hospital care and which methods were used to perform the tests. Results: Of the 15 laboratories registered in the CNES, 11 were interviewed (73%). 276,666 blood counts and 4,248 reticulocyte counts were performed in the last 12 months in all laboratories, which means the percentage of reticulocyte count of 1.5% in relation to the blood counts performed. Most of the laboratories are private (81%), medium-sized (54%) and carry out outpatient care (54%). To perform the blood count, most (81%) use the flow cytometry technique and for reticulocyte counting all perform the manual technique with the bright blue cresyl reagent. Conclusions: The percentage of reticulocyte counts in relation to blood counts performed in laboratories in the city of Divinópolis/MG is low, even though it is the first complementary exam for the differential diagnosis of anemia. This low request may be related to the devaluation of the reticulocyte in the clinical environment or the lack of accuracy and poor reproducibility of the results found. (AU)

Evaluation of the interference of platelets in reticulocyte counting by flow cytometry using thiazole orange / Avaliação da interferência de plaquetas na contagem de reticulócitos por citometria de fluxo, utilizando laranja de tiazol

ABSTRACT Introduction: The reticulocyte count by flow cytometry (FC) - an automated counting method - can present errors due to the presence of interfering factors, contributing to a slight increase in results. However, automated methods have large advantages over the manual method, taken as reference, what justifies efforts to improve their quality. Objective: Evaluate platelet interference with the reticulocyte count by FC, using thiazole orange (TO) (FC/TO). Materials and methods: The method of reticulocyte count by FC/TO and a modified automated equivalent method, which excluded CD61-positive cells (platelets) from analysis (FC/TO/MOD), were compared to the manual method. Conclusion: Results were analyzed according to the recommendations of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) to assess interchangeability between the methods, by linear regression analysis and paired t-test. The exclusion of interfering fragments from result analysis by the modified method produced results in closer proximity to those of the reference method.

RESUMO Introdução: A contagem de reticulócitos por citometria de fluxo (CF) - um método de contagem automatizada - pode apresentar erros devido à presença de interferentes, contribuindo para uma ligeira elevação dos resultados. No entanto, os métodos automatizados possuem grandes vantagens em relação ao manual, tido como referência, o que justifica esforços para a melhoria de sua qualidade. Objetivo: Avaliar a interferência de plaquetas na contagem de reticulócitos por CF, utilizando laranja de tiazol (thiazole orange [TO]) (CF/TO). Materiais e métodos: O método de contagem de reticulócitos por CF/TO e um método equivalente automatizado modificado, no qual se excluíram células CD61-positivas (plaquetas) da análise (CF/TO/MOD), foram comparados com o método manual. Conclusão: Os resultados foram analisados de acordo com as recomendações do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) para avaliar a intercambialidade entre os métodos, por meio da análise de regressão linear e do teste t pareado. A exclusão de interferentes da análise dos resultados pelo método modificado demonstrou maior proximidade dos resultados com aqueles do método de referência.

Reticulocyte count: comparison among methods / Contagem de reticulócitos: comparação entre métodos

Introduction: The automated counting of reticulocytes has some advantages over the manual method routinely used in clinical laboratories. Technological innovations provide more statistically reliable results, while optimizing the time to perform this test. However, the cost for implementing the automated procedure in laboratory routines still constitutes a barrier to its use in small- and medium-size Brazilian laboratories. Objective: This study evaluated the performance of a new laboratory protocol for reticulocyte counting by flow cytometry using acridine orange (FC/AO), compared with the manual method and with another automated one by flow cytometry using the commercial kit BD Retic-Count (FC/RC) Conclusion: The results showed that, besides being comparable to the manual method, still considered standard, the evaluated new protocol is economically more advantageous than the automated methods currently available, and its cost is comparable to that of the manual method for laboratories that already have appropriate equipment and infrastructure. .

Introdução: A contagem automatizada de reticulócitos apresenta vantagens em relação ao método manual, rotineiramente utilizado em laboratórios clínicos. Inovações tecnológicas permitem resultados estatisticamente mais confiáveis, além de otimizarem o tempo para realização desse exame. No entanto, o custo para aplicação do procedimento automatizado em rotinas laboratoriais ainda constitui uma barreira para sua implementação em laboratórios brasileiros de pequeno e médio porte. Objetivo: O presente estudo avaliou o desempenho de um protocolo laboratorial para contagem de reticulócitos por citometria de fluxo utilizando acridine orange (CF/AO), comparando-o com o método manual e o automatizado por citometria de fluxo utilizando o kit comercial BD Retic-Count (CF/RC). Conclusão: Os resultados mostraram que, além de ser comparável com o método manual, ainda considerado padrão, o protocolo avaliado é economicamente mais vantajoso do que os métodos automatizados atualmente disponíveis, sendo o seu custo comparável com o do método manual para laboratórios que já apresentam aparelhagem e infraestrutura adequadas. .

Contagem de reticulócitos por citometria de fluxo utilizando acridine orange: validação de um novo protocolo / Flow cytometry reticulocyte counting using acridine orange: validation of a new protocol

Introduction: Currently, the reticulocyte counting is a challenge for clinical laboratories in Brazil, mainly for the ordinary ones, which still use the manual method. This method has some limitations, since it consists of a laborious method, time consuming, with low accuracy. Objectives: This study has developed and evaluated the performance of a New Laboratory Protocol for flow cytometry (FC) reticulocytes counting using acridine orange (AO) as dye, aiming to standardize a more precise, easy, fast implementation, and low cost protocol. After standardization of the New Protocol (FC/AO), it was compared with the manual method. The results were analyzed according to the recommendations of the National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), now known as Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), to evaluate the interchangeability of methods in linear regression analysis and paired t test, besides other quality control tests. Conclusion: Based on these results concerning to the correlation between the methods and the tests related to quality control, we can admit that FC/AO for reticulocyte counting shows undeniable advantages when compared to the preexisting manual method...

Introdução: Atualmente, a contagem de reticulócitos representa um desafio para os laboratórios clínicos no Brasil, principalmente os de pequeno e médio porte, nos quais ainda se utiliza o método manual. Este método apresenta algumas limitações, classificando-se como tedioso, demorado e de baixa precisão. Objetivos: O presente estudo desenvolveu e avaliou o desempenho de um novo protocolo laboratorial para contagem de reticulócitos por citometria de fluxo (CF) utilizando acridine orange (AO) como corante, visando padronizar um protocolo preciso, de fácil e rápida execução e custo acessível. Após a padronização do novo protocolo desenvolvido (CF/AO), fez-se a comparação com o método manual. Os resultados foram analisados de acordo com recomendações do National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS), atualmente Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), para avaliar a intercambialidade entre os métodos, por meio da análise de regressão linear e teste t pareado, além de outros testes de controle de qualidade. Conclusão: Diante dos resultados obtidos referentes à correlação entre os métodos e os testes voltados ao controle de qualidade, pode-se admitir que o CF/AO estabelecido para contagem de reticulócitos possui vantagens inegáveis quando comparado com o método manual...